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果糖-1,6-二磷酸酶測試盒使用說明

更新時(shí)間：2021-04-21      瀏覽次數(shù)：1362

果糖-1,6-二磷酸酶測試盒使用說明

測定意義：果糖-1,6 二磷酸酶又稱果糖1,6 二磷酸酯酶，催化1,6 二磷酸果糖和水生成6 磷酸果糖和無機(jī)磷，在糖的異生代謝和光合作用同化物蔗糖的合成中起關(guān)鍵性的作用。

測定原理：FBP 催化1,6 二磷酸果糖和水生成6 磷酸果糖和無機(jī)磷，在反應(yīng)體系中添加的磷酸葡萄糖異構(gòu)酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH，340nm下測定NADPH增加速率，即可計(jì)算FBP 活性。

需自備的儀器和用品：分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。


樣本處理
1、組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加入 1mL 提取液）進(jìn)行冰 浴勻漿。于 4℃，8000g，離心 10min，取上清，置冰上待測。

2、細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（10 4 個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)胞加入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時(shí)間 3min），于 4℃，8000g，離心 10min， 取上清，置冰上待測。

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